抗體及冷凍干燥
發(fā)布時間:2020-08-17 點擊次數(shù):1789次
抗體是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白??贵w按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等??贵w在醫(yī)療實踐中應(yīng)用廣泛??贵w的溶解方法是用移液器加0.1ml雙蒸水到試管內(nèi),混勻,-20℃保存。怎樣分裝呢?抗體溶解后,將其分裝成 5-10 支(如 0.1ml 抗體, 20ulx5 支或 10ulx10 支), -20℃保存,用一支取一支,避免反復(fù)凍溶。抗原抗體凍干保護(hù)劑機(jī)理:甘油、山梨醇可以保持抗原抗體表面的滋潤,使其不至于因失水而失活。以血漿為例介紹一下其制備及冷凍干燥1.先將冰凍血漿在37℃以下合并融化。2. 將血漿溫度降至0℃,在攪拌的條件下,加-20℃95%的乙醇,使乙醇終濃度為20%,溫度保持在-4.5~-5.0℃,產(chǎn)生的沉淀含有大多數(shù)種類的免疫球蛋白;3. 沉淀用10倍的冰水溶解,在攪拌條件下,加-20℃95%的乙醇,使乙醇終濃度為8%,溫度保持在-1~-2℃,產(chǎn)生沉淀;4.分離出上清液,在攪拌條件下,加入-20℃95%的乙醇,使乙醇濃度到達(dá)15%,溫度保持在-2~-3℃,分離出沉淀;5. 將沉淀懸浮在10倍冰水中,用0.45μm濾芯過濾,濾液用S/D法滅活;6. 滅活后,100k超濾濃縮;7.選用層析柱,上柱層析吸附雜蛋白,在峰收集,所得即為較高純度的IgM;8. 將收集液超濾脫醇濃縮,確定計量制品體積,將濃縮液配制,以符合規(guī)定的理化指標(biāo),然后除菌過濾,分裝,半壓塞,入柜凍干.9. 凍干結(jié)束后,真空壓塞,制品出柜壓蓋,然后將制品置于沸水浴中30分鐘進(jìn)行干熱滅活;10. 對干熱滅活后的制品進(jìn)行檢驗,合格品于2~8℃儲存。
型號 | Pilot2-4M | Pilot3-6M | Pilot5-8M | Pilot7-12M | Pilot10-15M |
凍干面積 | 0.2㎡ | 0.35㎡ | 0.525㎡ | 0.8㎡ | 1.0㎡ |
板層尺寸(mm) | 375*270 | 350*500 | 350*500 | 350*570 | 350*570 |
冷阱溫度 (空載) | -85℃ | -85℃ | -85℃ | -85℃ | -85℃ |
真空度 (空載) | <6Pa | <3Pa | <3Pa | <3Pa | <3Pa |
板層溫度(空載) | -55℃ | -55℃ | -55℃ | -55℃ | -55℃ |
板層制冷方式 | 硅油循環(huán) |
捕水能力 | 4L | 6L | 8L | 12L | 15L |
凍干效率 | 3L/24H | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
壓塞 | 手動 | 電動 |